核酸染料選擇指南,請(qǐng)點(diǎn)擊http://qtkk.com.cn/news_detail.aspx?NewsID=24
EB染色液
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
EB001-04
|
EB染色液
|
10
ml
|
-
|
說(shuō)明書
|
一份
|
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
EB染色液是EB的水溶液,濃度為10mg/ml。EB(溴化乙錠)能與核酸分子特異結(jié)合,用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應(yīng)用于核酸電泳前后的染色以及流式細(xì)胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量為394.32)含有一個(gè)可以嵌入DNA 堿基的三環(huán)平面基團(tuán)。它與DNA 的結(jié)合沒(méi)有堿基序列特異性。大約每2.5 個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后,紫外激發(fā)后呈現(xiàn)熒光,可以檢測(cè)到10ng 的DNA 條帶。
● 保存、運(yùn)輸及效期:
常溫避光保存;常溫運(yùn)輸;有效期兩年。
● 注意事項(xiàng):
EB有一定毒性,使用時(shí)請(qǐng)使用一次性手套操作,注意防護(hù)!
● 使用說(shuō)明:
使用前,先離心快甩EB溶液至管底,以防開蓋后EB造成的污染。
1. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(預(yù)染法):
1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。
2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí),按照稀釋10000倍加入10 mg/ml EB溶液,如100ml凝膠加入EB量為10 μl;徹底搖勻后鋪膠并插入梳子。
3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。
4. 上樣電泳,電泳結(jié)束后紫外觀察。
注:預(yù)染法,EB染色會(huì)出現(xiàn)陰陽(yáng)膠現(xiàn)象,即隨著電泳時(shí)間延長(zhǎng),較小的片段會(huì)染色不清楚。參見實(shí)驗(yàn)示例。可以將凝膠用后染法染色即可看到小片段條帶。
2. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(后染法):
1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。
2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí),不要加入EB溶液,直接鋪膠并插入梳子。
3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。
4. 上樣電泳。
5. 電泳結(jié)束后將凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 緩沖液中加入100-200 μl EB溶液,混勻)染色15-20分鐘;TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鐘。
6. 紫外觀察結(jié)果。
● 實(shí)驗(yàn)示例: