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EB染色液

● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

EB染色液是EB的水溶液，濃度為10mg/ml。EB（溴化乙錠）能與核酸分子特異結(jié)合，用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應(yīng)用于核酸電泳前后的染色以及流式細(xì)胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠（Ethidium Bromide；C₂₁H₂0N₃Br；分子量為394.32）含有一個(gè)可以嵌入DNA 堿基的三環(huán)平面基團(tuán)。它與DNA 的結(jié)合沒(méi)有堿基序列特異性。大約每2.5 個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后，紫外激發(fā)后呈現(xiàn)熒光，可以檢測(cè)到10ng 的DNA 條帶。

● 保存、運(yùn)輸及效期：

常溫避光保存；常溫運(yùn)輸；有效期兩年。

● 注意事項(xiàng)：

    EB有一定毒性，使用時(shí)請(qǐng)使用一次性手套操作，注意防護(hù)！

●  使用說(shuō)明：

使用前，先離心快甩EB溶液至管底，以防開蓋后EB造成的污染。

1. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（預(yù)染法）：

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí)，按照稀釋10000倍加入10 mg/ml EB溶液，如100ml凝膠加入EB量為10 μl；徹底搖勻后鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后，將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳，電泳結(jié)束后紫外觀察。

注：預(yù)染法，EB染色會(huì)出現(xiàn)陰陽(yáng)膠現(xiàn)象，即隨著電泳時(shí)間延長(zhǎng)，較小的片段會(huì)染色不清楚。參見實(shí)驗(yàn)示例。可以將凝膠用后染法染色即可看到小片段條帶。

2. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（后染法）：

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí)，不要加入EB溶液，直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后，將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳。

5. 電泳結(jié)束后將凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中（染色液配制：100ml 緩沖液中加入100-200 μl EB溶液，混勻）染色15-20分鐘；TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鐘。

6. 紫外觀察結(jié)果。

●  實(shí)驗(yàn)示例：