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 RealRed核酸染色劑（GelRed）

●  產(chǎn)品規(guī)格：

● 簡介：

RealRed?是一種可以替代溴化乙錠（EB）的紅色熒光核酸染色劑，與GelRed是類似產(chǎn)品。與SYBR或EB相比，RealRed最顯著的特性是其在多種條件下的高靈敏性和穩(wěn)定性。另外相對(duì)EB或SYBR，RealRed?誘導(dǎo)突變的能力極低。染色劑溶解于水中，為10000×濃度。

● 貯存及運(yùn)輸：

4-8℃避光保存2年；常溫運(yùn)輸。

●  RealRed的使用方法：

注意：染料使用前應(yīng)在室溫下徹底融化混勻后使用。

1.  RealRed預(yù)染方法（推薦方法）：

1.1 將RealRed試劑按1:10000溶于瓊脂糖凝膠溶液中，充分混勻。（例如：將5 μl RealRed 試劑加入到50 ml 凝膠溶液中）。注：由于RealRed 具有出色的熱穩(wěn)定性，可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中，而不用等凝膠溶液冷卻后再加入。

1.2 澆制凝膠并使其凝固后上樣電泳。

注意：使用這種預(yù)先加入染色劑的瓊脂糖凝膠，每次不易加入太多的 DNA 樣品，否則容易造成飽和現(xiàn)象，可以做多個(gè)不同濃度的 DNA Marker，以確定最佳 DNA 上樣量。

1.3 紫外下觀察結(jié)果。

注：如果始終出現(xiàn)拖尾或是條帶無法分離的現(xiàn)象，您可以使用后染法對(duì)DNA染色，以確認(rèn)問題是否與染色劑有關(guān)。如果使用后染法問題依舊存在，則說明問題與染色劑無關(guān)，請(qǐng)嘗試減少核酸的上樣量后進(jìn)行電泳。

2.  RealRed后染方法：

2.1 用H₂O將RealRed稀釋約3,300倍到0.1MNacl中，制成3×染色溶液。(例如：將15 μl RealRed和5ml的1MNaCl加入到45 ml H₂O中)。注：RealRed 1×染色溶液同樣可用于后染，但其靈敏度要低于3×染色溶液。

2.2 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3×染色溶液浸沒凝膠。

2.3 在室溫下輕輕地?fù)u動(dòng)凝膠板，最佳的染膠時(shí)間為30 分鐘，這取決于凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高，染色所需要的時(shí)間就越長。注：染色溶液至少可重復(fù)使用2-3次。如果不是立即再用的話，建議將用過的染色溶液冷藏保存。

2.4 紫外下觀察結(jié)果。