蛋白酶抑制劑混合物(100×,通用型)
產(chǎn)品編號
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規(guī)格
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貯存
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運(yùn)輸
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PC1930-01
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1 ml
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-20℃
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濕冰
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PC1930-02
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5×1 ml
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-20℃
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濕冰
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● 儲存條件
-20℃保存,有效期一年。
● 產(chǎn)品簡介
蛋白酶抑制劑混合物(通用型,
100×) (Protease inhibitor cocktail for general use, 100×)
是一種通用型用于細(xì)胞或組織蛋白提取等的蛋白酶抑制劑混合物(200mMAEBSF,
30μM Aprotinin, 1 mMBestatin,1.4mME64 and 1mMLeupeptin in DMSO),并提供獨(dú)立包裝的0.1MEDTA。EDTA為單獨(dú)包裝,以便選擇性使用。如用于檢測金屬蛋白酶活性,則不宜添加EDTA。
細(xì)胞或組織提取物等樣品中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物等樣品中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌浮⒘姿崦傅纫种苿┦欠乐沟鞍捉到夂腿バ揎椀挠行Х椒ā?
本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測試的用于常規(guī)細(xì)胞或組織蛋白提取等的蛋白酶抑制劑混合物,包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑以及氨基肽酶抑制劑。
本產(chǎn)品使用便捷,通常以1:100的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物(通用型,
100×)和0.1MEDTA(100×)加入裂解液中,即可用于常規(guī)的細(xì)胞或組織蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
本產(chǎn)品可以有效抑制常規(guī)細(xì)胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性,如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑,其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作為PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。Aprotinin是絲氨酸蛋白酶的競爭性可逆抑制劑;Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑;Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑;EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。
一個包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于100ml裂解液的配制。
● 使用方法:
1.
本蛋白酶抑制劑混合物為100×的儲存液,使用時按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),混勻后即可使用。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配,不宜配制后凍存待后續(xù)使用。根據(jù)需要,0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。
2.
待所需的抑制劑添加完畢混勻后,就可以開始進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞或組織的裂解和蛋白提取。
提示:蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復(fù)凍融,第一次使用后,可按照每次使用量分裝凍存。